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微測生物擁有專業(yè)的抗體制備技術團隊,為您提供一站式地抗體制備服務。我們提供的抗體服務包括:多克隆抗體制備、單克隆體制備、抗體純化等。
一、多克隆抗體制備服務流程
多克隆抗體制備流程 |
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動物免疫(宿主動物可提供兔、羊、雞、小鼠) |
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設計實驗方案 |
客戶有特殊需求,需提供詳細的實驗要求 |
2-3工作日 |
免疫實驗動物 |
分為三到四次免疫,Elisa檢測即時效價 |
6-12周 |
微測Elisa檢測 |
以免疫原為抗原樣品,保證Elisa檢測效價1:10000以上 |
1周 |
客戶檢測 |
自行設計檢測方案 |
1周 |
合格,抗體及技術服務報告交付客戶;不合格,服務停止; |
二、單克隆抗體制備服務流程
單克隆抗體制備服務流程 |
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第一階段:免疫小鼠 |
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設計實驗方案 |
客戶有特殊需求,需提供詳細的實驗要求 |
2工作日 |
免疫實驗動物 |
5只6-8周齡BALB/C小鼠,Elisa檢測即時效價 |
7-8周 |
Elisa檢測 |
以免疫原為抗原樣品,保證Elisa檢測效價1:10000以上 |
1周 |
第二階段:單克隆雜交瘤細胞株的建立 |
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細胞融合 |
取小鼠的脾細胞與骨髓瘤細胞融合,篩選陽性克隆 |
2-3周 |
克隆擴增和初選 |
擴增并低溫保存一個成功融合的產(chǎn)物 |
1周 |
亞克隆 |
有限稀釋法亞克隆至形成穩(wěn)定的單克隆融合細胞株 |
4-6周 |
抗體鑒定(依據(jù)訂單要求) |
測定上清抗體亞型、特異性、抗體中和反應性及抗體配對參數(shù) |
1-4周 |
腹水制備/轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng) |
依據(jù)客戶要求,提供不同種類服務 |
4-6周 |
抗體純化 |
利用Protein A親和純化 |
1周 |
第三階段:單克隆雜交瘤細胞株的驗收 |
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提供的雜交瘤培養(yǎng)物的腹水(或上清液)與顧客方提供的抗原樣品有特異性結(jié)合,同時抗體特異性只針對客戶方提供的抗原樣品做出保證 |
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第四階段:單克隆雜交瘤細胞株的交付 |
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2-3株雜交瘤細胞株和少量腹水(或上清液),需要純化的訂單會依據(jù)訂單要求提供純化后抗體,并給出相應的鑒定報告(包括單抗的亞型) |
三、抗體純化服務流程
抗體純化 |
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抗原親和純化 |
使用抗原偶聯(lián)Sepharose 4B制備抗原親和純化層析柱,僅捕獲針對抗原的特異性抗體,純化得到的抗體產(chǎn)物純度高到90%以上,特異性強、靈敏度高,能明顯減低背景信噪干擾,是抗體純化中最佳的實驗方法之一 |
1-2周 |
Protein A/G純化 |
特異性的捕獲樣品中的IgG,性價比較高,特別適用于大規(guī)模樣品的純化 |
1-2周 |
飽和硫酸銨沉淀法純化 |
分離所有的免疫球蛋白,得率最高,但特異性和靈敏度偏低,僅適用于定性分析 |
1周 |